发布时间:17-05-03 14:50分类:技术文章 标签:PCR仪,我想问一下PCR仪有哪些种类,如何选购 摘要:PCR仪的种类有很多,据我所了解的大致有四种,普通的PCR仪、原位PCR仪、梯度PCR仪、实时荧光定量PCR仪,这些产品爱仪器仪表网上面都有卖的,如果你想购买PCR仪的话,我建议你不妨去爱仪器仪表网咨询下!PCR仪的种类分类总是五花八门,总体来说可以分为PCR扩增仪和实时荧光PCR仪两大类,有人也把它们称为半自动和全自动,或者定性和定量,都是比较不准确的称呼。PCR*重要的*是个升降温过程,*初的水浴锅式PCR,*是三个水浴箱,一个机械臂,定时抓出反应槽转换水浴锅。这种东东体积大,迅速慢,但其实结果并不比以后的PCR仪差,我现在都很欣赏。后来有人利用致冷和加热做成了,固定位置升降温的PCR扩增仪。后来随着定量技术的发展,有公司将扩增仪和检测做成一体,也*成了现在所谓的全自动(或定量)PCR仪。当然标准的叫实时荧光定量PCR仪。品牌什么东西都有品牌,现在国内国外PCR仪的品牌很多,*国外而言比较著名的有:ABI美国应用生物公司:老牌的生物公司贵族,其收购了原来的PE,而PE公司是PCR的鼻祖,旗下有很多经典的PCR仪,有5700(已停产)、7700(已停产)、7000、7900等实时荧光定量PCR仪。ROCHE罗氏诊断:炙手可热的新贵,LIGHTCYCLER是其*的PCR仪,市场做得很不错,以科研定位为主,但在国内很多医院使用,其很特色离心、气加热、毛细管等,设计另类,是*有特色的PCR仪,当然好坏另议,*单其另辟蹊径的技术能力和胆识*值的佩服。MJ:刚入中国的名流,MJ的扩增仪在生命科研领域比较出名,其产品比较适合高通量检测,人类基因组计划用得很多。其实时荧光PCR仪刚进入中国不久,孔间能使用不同温度是其特色。这点其实比较有用。伯乐:呵,廉价的麦当劳,ICYCLER是其主打,进入中国已经比较久了,产品和5700一样,是扩增仪上加装定量模块而成,特点是价格较低。国内现在做的也很多,比如北京熙缜隆博环保科技有限公司等。选购准确的讲包括实时荧光定量在内都没有自动加样和标本处理系统,只能算半自动的。PCR仪是个简单的东东,一个温控设备和一个检测设备而已。关于温控,主要是介质问题。理想的介质是导热性好、比热大、接触紧密的东东。这方面*好的是水浴和油浴,比热大(油比水更大)、溶剂化物体,与反应物无缝接触,效果当然*好。但是自动化,小型化难,只有*初的水浴锅式使用。硅加热,这是使用*普遍的一种,优点:易自动化、速度快、直接加热降温,效果当然好,但是*成本较高,第二其使用的介质是金属,导热虽然好,但是与反应管,很难做到无缝接触,定性时代可以加油,但用荧光定*,由于油有荧光信号不能用。所以在无缝接触上差一些。第三由于是底部加热,下部压力较大,有溢出的可能,不过新的仪器在加热盖以后解决了这个问题。空气加热,用空气做介质有优点,与反应体系无缝接触,但是空气的导热性差、比热小的弱点明显。因此空气加热的要利用离心来产生空气流动,增强导热性,同时使用毛细管,加大接触面积、试剂微量化来弥补。这样做了以后效果还是不错。但有的厂商把什么离心、毛细管的好处大讲特讲,对气加热的弱点闭口不谈,却是高明的市场手法。同时,使用离心,对标本量增大是有影响的并且标本量越大,空气比热小的弱点*越明显,所以空所加热的仪器标本量都比较小。使用毛细管后由于反应液与管的接触面积增大,吸附现象更大,因此试剂的通用性差一般要专门开发,成本高,虽然试剂用量少,但因为是专用试剂,每人份*是以实际量算,并不省试剂。反而增加了毛细管成本。关于功能,所有的PCR仪功能都大体相同。只有MJ孔间能使用不同温度比较*特,这对于多项目同时检测以及循环参数的调整比较有用。但其实时荧光的仪器刚进入中国不久,具体如何还不得而知。关于选购,根据单位情况而定,由于PCR的技术含量其实并不高,好的国产仪器如杭州博日(与日本著名厂商大和有关)也差不太多。关于进口仪器,罗氏的仪器不错,但如果标本量大,建议不要用罗氏。一则会累死的。另外,每个标本要分摊的标准曲线、对照成本太高。同时,试剂也比较受限。如果您想了解有关PCR仪的相关问题,可以直接登录www.ai1718.com网站,或者直接拨打爱仪器仪表网客服热线010-68940148,我们会真诚的为您服务的。

随着生命科学研究不断的突破性发展,聚合酶链式反应(PCR)技术也得到了大力发展,重要性日渐凸显。这也使得PCR仪成为生命科学研究实验室中不可缺少的一部分。PCR,中文称为聚合酶链式反应,其实是一种DNA的快速扩增技术,PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。PCR技术引起了分子生物学研究的一场革命,推动了微观领域的生物学研究。现在PCR仪已经被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面。PCR仪一般分为普通PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪以及实时荧光定量PCR仪四类。普通PCR仪是指一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,能够应用于简单的目的基因退火温度的扩增。梯度PCR仪则是设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),一次性PCR扩增,就可以筛选出表达量高的最适退火温度,进行有效的扩增。梯度PCR仪主要用于快速、低成本的进行未知DNA退火温度的扩增。原位PCR仪是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,主要用于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变。在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。主要用于医学临床检测,生物医药研发,食品行业,科研院校等机构。目前在PCR仪市场中,较为有名的品牌及厂商有ABI美国应用生物公司、ROCHE罗氏诊断、MJ、伯乐等,以及国内的杭州博日、杭州朗基、上海枫岭、厦门安普利等。ABI美国应用生物公司在PCR仪市场中占据极其重要的地位,尤其是其收购了PCR仪的鼻祖PE公司,实力更为雄厚,有多款经典PCR仪。ROCHE罗氏诊断推出的PCR仪相比较而言,更具有特色,以科研定位为主。MJ的PCR扩增仪在生命科研领域比较出名,其产品比较适合高通量检测,常用于人类基因组计划等。伯乐的PCR仪则性价比相对高一些,其扩增仪上往往会加装定量模块。消费者在选购时,可根据实际需求情况,标本数量、参照每个标本要分摊的标准曲线、对照成本、试剂选择等进行综合考虑。凡本网注明“来源:维库仪器仪表网” 的所有作品,转载请必须注明来源于本网,违者必究。 标签: 扩增仪

不过Smart CyclerII需要使用独家的扁平反应管,增加了反应成本,上样也不如传统的方法方便,而且16个样品槽也不大适合批量反应的要求――不过Smart Cycler II的软件设计允许一台电脑同时操作6台Smart Cycler II,部分弥补了缺憾。所以Smart Cycler II会更适合多成员、样本量不大、要求快速出结果的实验室。不是每个实验室都总是要同时检测几十上百个样品吧?

发布时间:17-05-11 17:49分类:技术文章 标签:PCR仪,PCR仪有哪些类型? 根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR,实时荧光定量PCR仪等几类。1、普通PCR仪一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。2、梯度PCR仪一次性PCR扩增可以设臵一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其*适合的退火温度不同,通过设臵一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增*可以筛选出表达量高的*适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设臵梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。真正的梯度,是每一排管都有精确的加热控温探头,2009年为止只有美国ABI公司可以做到。其他的都是从两头的热传递来设计控温。梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。3、原位PCR仪(有些品牌的PCR仪具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通过替换模块进行多用途开展实验工作)是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。如病原基因在细胞的位臵或目的基因在细胞内的作用位臵等。可保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位臵进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,还能标出靶序列在细胞内的位臵。于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。4、实时荧光定量PCR仪(fluorescencerquantitivepolymerasechainreaction,FQPCR)在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。实时荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。

在选购定量PCR前之前我们需要先了解自己的需要――是同时检测大量样本?还是小规模的研究?是固定的标准化检测方法还是有机会尝试不同的方法?随着技术的加速发展不断有新的荧光素、标记方法和试剂盒面市,还要考虑仪器性能在将来的可拓展性等等。生物通撰写本文的目的并非指出哪一类的仪器更适合我们的需要――毕竟不同应用领域、不同的实验室有着不同的需求,所以了解不同类型的定量PCR仪的特点有助于选择更适合自己需要的仪器,“不求最好,但求适合”。

由于转子在反应过程之中一直以恒定的低速旋转,使得样品间的温度均一性极佳,同一热反应室提供完全相同的反应条件,同一光学通路提供完全相同的测量通道,每标本每循环检测32次,满足高精度和一致性要求。Rotot-Gene3000提供了36 x0.2ml和72x0.1ml两种转子,检测是通过薄壁管侧壁而非管底进行的,因而可以使用普通的0.2ml PCR管,并允许在试管盖上标记,这降低了使用成本。Rotot-Gene3000的温控速度不如LightCycler,但优于多数的固定加热模块的机型,能达到5℃/秒。Corbett还有一个光学变性专利――让待扩增样品预先进行一次熔解曲线程序,检测荧光染料信号大小的变化,找到代表全部双链DNA解链的峰值对应温度,在其后的反应中就无需总是将变性温度设为94度,也不需要延长孵育时间。这个专利使得反应过程大大缩短。Rotot-Gene主要的问题也是可容纳的样品数量少,只能靠反应速度快,同样的时间可以多运行几轮反应来弥补。对于大量样品的实验室, Corbett同时还提供定量PCR反应自动加样系统,不单可以和自家的Rotor-Gene配套使用提高工作效率和均一性、安全性,也可以配套 Roche和ABI的定量PCR仪。这样就不用担心加样累坏了。

3.第三类的荧光定量pcr仪以cepher公司的smart%20cyclerii为代表,对于国内的用户来说比较新鲜,但这个一直受美国国防部和安全局、美国军队传染病医学研究中心、美国军队士兵和生物化学合作所资助的公司却相当有来头。smart% 20cyclerii获得过1998年美国研发r&d100金奖。smart%20cyclerii的机型小巧,只有16个样品槽,它的独到之处在于这16个样品槽分别拥有独立的智能升降温模块,也就是说这16个样品槽相当于16台独立的定量pcr仪!独立控温的好处首先是,你可以在同一定量 pcr仪上分别进行不同条件的定量pcr反应,更为灵活自定义的梯度优化反应也好,或者是完全不同的几组反应――甚至,你可能只进行个别样品的检测,只占用其中几个样品槽――过一会儿其它的同事也要用――他不需要等待你的反应结束,而可以随时利用空置的样品槽开始其它定量反应!对于各有各忙的多成员的实验室,要是个别样品就占据96孔样品槽,其它人每轮要再等2个多小时,有时还要等几轮,那可够郁闷的。smart%20cycler%20ii的使用频率可以被最大化,大家都不用等待!这个世界上唯一允许不同条件pcr同时进行的定量pcr仪拥有独一无二的优点,是其它任何平板式或者离心式定量pcr都不具备的。